培养基放多久不换，关于培养基知多少？

何时须更换培养基视细胞生长密度而定，常规细胞2-3天更换培养基。AC16细胞常见问题1何时须更换培养基视细胞生长密度而定，常规细胞2-3天更换培养基。（4）注意个人卫生：经血是细菌的培养基，故月经期间的卫生非常重要。

试管繁殖是通过将八放珊瑚的幼体、雏体或碎片放入培养基中，培育其成长为成体。分瓶（传代、细胞数批减少），细胞数量不断增长，超出容器和培养基的负荷。10.如何用台盘兰计数活细胞无血清培养基把细胞悬液稀释到200～2000个/毫升，在0.1毫升的细胞悬液中加入0.1毫升的0.4%的台盼兰溶液。

如何长期维持你的细胞株？给养（给予新鲜的培养基），细胞生长过程中会消耗培养基中的某些必需因子，必须更换培养基。每一细胞株均有其特定使用且已适应的细胞培养基，若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基，细胞大都无法立即适应，易造成细胞状态不好，最终造成细胞无法存活。

建议胰蛋白酶处理细胞前，用EDTA清洗细胞，以消除来自培养基中所有的二价离子13.可否使用与原先不同的培养基不能。（PS:培养和传代是同时进行的，很难只进行一个而不进行另一个操作。

5.悬浮性细胞应如何传代处理一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，将细胞悬液移入离心管中，1000rpm/min室温离心5min。消化液浓度过高时，易造成培养基中细胞碎片增多，黑渣子增多，常规细胞传代时建议用0.05%的胰酶进行消化，对于难消化的细胞可采用0.25%胰酶进行消化，细胞密度过高超过80%时，采用分步消化法。

细胞培养传代常见问题汇总，有哪些是你经常遇到1.一般拿到细胞后，应注意什么收到细胞先不开盖，用酒精将整个细胞瓶外壁进行消毒，放在培养箱静置若干小时后（看细胞密度而定）在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收细胞时的培养基拍一张照片，观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞100X，200X各两张），排除细胞本身污染的情况。

4.贴壁细胞如何进行传代去掉原T25培养瓶里面的培养基，T25瓶加3-4mlPBS洗1-2次；弃PBS，再加1.5ml的Trypsin-EDTA（1X）消化液消化细胞，显微镜下观察，待细胞变圆，细胞间隙明显，部分细胞刚开始脱离瓶壁，加4ml左右完全培养液混匀终止消化，将细胞小心吹打下来，1000rpm/min室温离心5min；弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1：2-1：3，1：3-1：6，1：6-1：8），每T25瓶补足培养基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培养。

弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1：4-1：8），每T25瓶加完全培养液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培养。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。